כמדי שנה, אלפי בני אדם נזקקים לשירותי מגן דוד אדום במהלך יום כיפור, בין היתר בשל החום, הצום, סכנת התיישבות, חבלות במהלך נסיעה על אופניים ועוד.. מפרוץ המלחמה, בשמחת תורה תשפ"ג (7.10.23), מגן דוד אדום נמצא בכוננות גבוהה ובקשר רציף עם גורמי הביטחון. בשנה האחרונה, הארגון הרחיב את פריסת החובשים והפראמדיקים ברחבי הארץ ועיבה את מערך רכבי החירום במאות אמבולנסים, ניידות לטיפול נמרץ, אופנועים ורכבים ייחודיים נוספים של מד"א, בהם אוטובוס טיפול נמרץ חדש עם שבע מיטות ואמצעים לטיפול מציל חיים מתקדם. במהלך צום יום כיפור, כלל רכבי החירום של מד"א יהיו מאוישים ו-35,000 מתנדבי ועובדי מד"א יפעלו בכוננות גבוהה ויהיו ערוכים לתת מענה רפואי מהיר ומקצועי לכל צורך רפואי שעלול להתעורר.
בנוסף אלפי עובדי ומתנדבי מד"א יעבירו את יום הכיפורים בחיק משפחתם, כשאמבולנס של מד"א נמצא בביתם בכוננות ומוכן להזנקה בעת הצורך. בנוסף, כוננים רבים במד"א, אשר יתפללו בבתי כנסת ברחבי הארץ, יצטיידו במכשור רפואי מתקדם ובמכשירי מפעם (דפיברילטור), שיסייעו להם להציל חיי אדם במידת הצורך.